【测定原理】 本试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测猪肉等样本中的沙丁胺醇，在微孔条上预包被上偶联抗原，利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的原理来进行的，样本中的沙丁胺醇和微孔条上预包被偶联抗原竞争抗沙丁胺醇抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样品中的沙丁胺醇含量与样品的吸光度值呈反比，与标准曲线比较即可得出沙丁胺醇含量。 【试剂盒技术指标】 规 格：96孔盒 灵 敏 度： 0.1ppb 检测时间： 45min 样本检测下限： 尿 样 ………………………………… 0.1ppb 组 织（处理法一）…………………… 0.4ppb 肉样本（处理法二）…………………… 0.1ppb 饲 料 …… …………………………… 1ppb 交叉反应率： 沙丁胺醇（Salbutamol ）………………… 克伦特罗（Clenbuterol）………………… <0.1% 莱克多巴胺（Ractopamine）……………… <0.1% 多巴酚丁胺（dobutamine）……………… <0.1% 样本回收率： 尿 样 ……………………… 95%±10% 组 织 ……………………… 85%±15% 饲 料 ……………………… 85%±15% 【试剂盒组成】 1、 微量测试孔：1×96孔板（12条×8孔） 2、 （Clenbuterol标准溶液X6瓶：（1ml瓶）0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb 3、 酶标记抗体工作液 10ml………………绿色帽 4、 底物A液 7ml ……………………白色帽 5、 底物B液 7ml ……………………黑色帽 6、 终 止 液 7ml ……………………黄色帽 7、 20X浓缩洗涤液40 ml ………………透明帽样本处理前须知 处理任何样本时，都必须注意： （a）实验中必须使用一次性吸头，在吸取不同的试剂时要更换吸头。 （c）实验之前须检查各种实验器具是否干净，必要时可对实验器具进行清洁，以避免污染干扰实验结果。 样本前处理需配制： 配液1、0.1M HCl 溶液 取0.86ml浓HCl加水定溶至100ml。 配液2、0.1M NaOH 溶液 称取0.4g NaOH加水定溶至100ml。 配液3、乙腈-0.1M HCl 溶液 V乙腈：VHCl =84：16 （a）尿样本的处理方法 取20μl清亮尿样直接测定（如果尿样浑浊一定要过滤或离心10min，4000rmin，直至得到清亮尿样），暂不使用的样本应冷冻保存。 样本稀释倍数：1 （b）组织样本的处理方法一 1、 称2±0.05g组织，加入6ml去离子水，充分振荡2min，室温4000rmin以上离心10min(注：若组织样本中油脂含量较高，可在振荡后放入85℃水浴10min后再离心)。 2、 取20μl上清液进行分析。 样本稀释倍数：4 （c）组织样本的处理方法二 1、 称取2 ±0.05g的组织，加入6ml乙腈-0.1MHCl，振荡2min,室温4000rmin以上离心10min。 2、 取上清3ml，加入2ml 0.1M NaOH，加入6ml乙酸乙酯，振荡1min，室温4000rmin 以上离心10min。取全部上清于50℃氮气或空气吹干。 3、 加1ml三蒸水复溶，混合30s，取20μl进行分析。 样本稀释倍数：1 （d）饲料样品的处理方法 1. 称1.0±0.05g研碎的饲料样品，加入10ml甲醇，再加入5g无水硫酸钠，放振荡器上振荡2min；15℃ 4000rmin以上离心10min； 2. 吸出离心后的上清液1ml，于56℃氮气吹干，用1 ml 去离子水溶解干燥的残留物，再加入1mL正己烷混合30s ；15℃ 4000rmin以上离心5min。 3. 取20μl下层进行分析。 样本稀释倍数：10