样本处理前须知：1．实验中必须使用一次性吸头，在吸取不同的试剂时要更换吸头。2．实验之前须检查各种实验器具是否干净，必要时可对实验器具进行清洁，以避免污染干扰实验结果。样本前处理需配制：配液1：6M H3PO4 100mL 浓H3PO4（含量85%） 加去离子水150mL混合均匀配液2：1M NaOH 4g NaOH 加去离子水100mL溶解配液3：2M NaOH 8g NaOH 加去离子水100mL溶解配液4：乙腈-丙酮 80mL 乙腈 加入丙酮20mL混合均匀1． 将试剂盒从冷藏环境中取出并将所需试剂从试剂盒取出，置室温（20-25℃）平衡30min以上, 注意每种液体试剂使用前均须摇匀。2． 按需要取出微孔条及板架，将不用的微孔板重新密封，保存于2-8℃，不要冷冻。3． 加标准品样本50μL 孔，然后加入抗体工作液50μL 孔，再振荡混匀，用封板膜盖板，室温反应30min。4． 洗板4-5次，每次浸泡30秒，拍干。5． 加入酶标记物100μL 孔，用封板膜盖板，室温反应20min。6． 洗板4-5次，每次浸泡30秒，拍干。7． 显色：每孔加入底物缓冲液50μL，再加底物液50μL，轻轻振荡混匀，25℃环境避光显色10min。8．测定：每孔加入终止液50μL，轻轻振荡匀，设定酶标仪于450nm处（在20min内读完数据），测定吸光度值。